Hemasitometre ile Hücre Sayımı
Hemasitometre (Thoma lamı olarak da bilinir), üzerinde hassas bir şekilde ölçülendirilmiş bir kılcal ağ (grid) bulunan özel bir mikroskop lamıdır. Bu araç, bir sıvı numunedeki hücrelerin veya diğer parçacıkların konsantrasyonunu belirlemek için kullanılır.
Hücre Konsantrasyonu Formülü
Hücre konsantrasyonu, sayılan hücrelerin ortalaması alınarak ve hemasitometrenin bilinen hacmi kullanılarak hesaplanır:
Hücre/mL = (Toplam Hücre / Kare Sayısı) × Dilüsyon × 10⁴
- Toplam Hücre / Kare Sayısı: Bu terim, büyük bir karedeki ortalama hücre sayısını verir. Genellikle 4 köşe kare veya merkezdeki büyük kare sayılır.
- Dilüsyon Faktörü: Eğer hücre süspansiyonu sayım öncesi seyreltildiyse (örn: canlı/ölü ayrımı için Trypan Mavisi ile 1:1 karıştırıldıysa), bu faktör hesaba katılmalıdır. 1:1 seyreltme için faktör 2'dir. Seyreltme yoksa 1 alınır.
- 10⁴ Faktörü: Bu, hemasitometrenin bir büyük karesinin hacmini (0.1 µL veya 10⁻⁴ mL) 1 mL'ye çeviren standart bir katsayıdır.
Doğru bir sayım için, genellikle kare başına 20-50 hücre düşecek şekilde bir seyreltme yapılması önerilir. Çok yoğun veya çok seyrek numuneler sayım hatalarına yol açabilir.